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PCR儀的工作原理
點擊次數:730 發布時間:2018-09-18

PCR 擴增的步驟

首先將模板 DNA 置于 92℃ -96℃,進行變性(denaturation)處理,使 dsDNA 在高溫下解鏈成為 ssDNA ,且熱變性不改變其化學性質;然后退火(annealing) ,將溫度降至 37℃ -72℃,使引物與模板的互補區相結合;zui后,在 72℃ 條件下, DNA 聚合酶將 dNTP 連續加到引物的 3'-OH 端,合成 DNA ,這個步驟稱為延伸(extension)。這三個熱反應過程的重復稱為一個循環,經過 20-40 個循環可擴增得到大量位于兩條引物之間序列的 DNA 片段。

基本要素與DNA復制的基本要素是一致的。待拷貝的 DNA 稱為模板,它可以是雙鏈 DNA 也可是單鏈DNA,zui后擴增得到的產物是雙鏈狀態的。引物是 DNA 復制的先鋒,就象結晶過程中的晶核,引導 DNA 的合成。在 PCR 擴增中一般使用合成的寡核苷酸作引物。DNA 聚合酶是 DNA 復制的動力,在 dNTP 等底物存在時在引物的引導下沿著模板 DNA 合成互補的 DNA 鏈。

北京科譽興業科技發展有限公司(www.txqt.cc)主營Micro17R/21R離心機,Eppendorf5424R離心機,Bio-Rad伯樂C1000,T100PCR儀,Leica DMi1倒置顯微鏡
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